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革新细胞培养,探索新型CIK细胞培养的奥秘!

浏览: 发表时间:2023-12-14 10:00:00

近年来,随着现代医学的发展,以生物技术为基础的新兴治疗手段,尤其是细胞治疗发展迅速,其中 CIK 细胞治疗的应用时间较早且较为成熟,具有个体化、无免疫排斥和强抗肿瘤活性等特点,在多种恶性肿瘤如肺癌、胃癌、乳腺癌、肝癌等临床研究中展示出显著的疗效,尤其是在晚期癌症和难治性肿瘤的治疗中,CIK细胞疗法显示出了非常显著的优势。在2022年中国临床肿瘤学会(CSCO)上,《CSCO原发性肝癌诊疗指南2022版》将“CIK细胞疗法”写进肝切除术后辅助治疗推荐方案(证据水平:2A类)。


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细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer cells,CIK)是指将人外周血或脐带血单个核细胞(PBMC)在体外用多种细胞因子诱导而获得的一群异质细胞,CD3+CD56+细胞为其主要的效应细胞,在正常人外周血中极其罕见,仅1%~5%。CIK细胞免疫治疗的关键是能否获得足够数量并且具有高效杀伤活性的免疫效应细胞,因而CIK细胞的数量、纯度和活性尤为重要。

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CIK细胞疗法作为经典的免疫细胞治疗方法,已有20年历史,目前存在的CIK细胞培养技术及方法,仍有较大的提升空间,使细胞纯度更高、杀伤性更好、培养体系更稳定。


影响CIK细胞诱导扩增的主要因素


▶细胞来源和活性:由于个体化差异,所选用的外周血单个核细胞(PBMC)的数量及溶血易造成的血红蛋白升高直接影响到CIK细胞的培养效果。由于外周血中CIK细胞含量较少,使PBMC直接诱导培养出高纯度CIK具有一定的困难。据文献显示,脐带血单个核细胞(UBMC)诱导培养出的CIK细胞数量更多且杀伤活性更高。

▶细胞因子及试剂盒的选择:细胞因子如IL-2、IFN-γ等的添加浓度和时间,对CIK细胞的增殖和杀伤活性影响显著;如果细胞因子的选择不合适或浓度不足,可能导致CIK细胞的活性降低。

▶优质培养基的选择:培养基是提供细胞所需营养物质和环境条件的液体介质,对于维持细胞的生长、增殖和功能发挥起着关键作用。根据国家法律法规及监管要求,细胞治疗产品的生产用原材料主要为第3级的原材料,其组分均要求无TSE/BSE风险,建议应主要考虑无动物源成分的化学成分限定培养基。

▶个体免疫状态差异:不同个体的免疫状态和细胞特性可能存在差异,这也可能导致CIK诱导的成功率有所不同。例如放化疗患者免疫细胞数量偏少,血浆存在化疗药物的残留会影响细胞的诱导和扩增。


我司于2023年获得《一种免疫细胞活化剂及其制备方法和应用》(专利号:ZL 2021 1 1487820.4)专利技术转化成果。本发明涉及的核心技术免疫细胞活化剂,使用优质级细胞因子和医疗级重组蛋白,没有引入外源性的动物源蛋白、成分明确,联合独特的双抗诱导技术转化的《CIK Cell Culture Reagent》培养试剂盒能高效诱导活化CIK细胞,使培养的CIK细胞数量更多、纯度更高、杀瘤活性更强,为CIK细胞的培养提供更优方案。

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为了获得足够数量并且具有高效杀伤活性的CIK细胞外,除了添加的各种细胞因子,还有一个重要的因素是免疫细胞体外培养的载体-细胞培养基。《一种免疫细胞活化剂及其制备方法和应用》核心技术转化成果应用于化学成分限定无血清细胞培养基,既能满足高效诱导细胞活化,又能提高扩增倍数、增强杀瘤活性,满足免疫细胞临床应用。


化学成分限定培养基在CIK细胞培养中的优势


▶优化效果和功能:添加的特定细胞因子可以促进CIK细胞扩增和生存,优化培养基中的细胞增殖和生存条件,从而提高细胞的数量和质量,增强细胞的杀瘤活性。

▶有利细胞诱导分化:培养基中的化学成分可以直接影响细胞的生长、增殖、分化和功能表达等方面。限定特定的化学成分可以精确调节细胞的行为,促进增殖、提高CIK细胞表型等。

▶一致性和可重复性:不含动物源成分,使用高分子聚合物代替蛋白质,确保培养环境的一致性,以及培养过程的可重复性。通过精确控制培养基中的成分和浓度,可以消除批次间的差异,并确保每次培养都在相似的条件下进行。

▶安全性和标准化:降低潜在的风险和不确定性。通过使用已知和安全的化学成分,并避免使用动物血清等潜在的污染源,提高培养的安全性和标准化水平。



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近年来,贝索细胞一直致力于推动无血清细胞基及培养技术的研究与创新,并获多项发明专利及核心技术。我们将继续坚持“技术领先、服务至上”的发展理念,秉承“细胞科学、守护生命”的企业使命,不断加强技术创新和产品研发,为客户提供高质量的产品和优质服务,为推动细胞治疗事业发展贡献力量。

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