7、血浆如何灭活，灭活不彻底导致的培养问题？

血浆需彻底灭活，消灭补体的活性，需56℃灭活30min，静置到室温后1200g离心10min，去掉沉淀后再使用。

如果血浆灭活不彻底，在细胞培养前期，会导致贴壁的细胞增多，转瓶或转袋细胞吹打不下来，造成细胞损失，最终导致培养的细胞数量和流式表型没有达到预期效果，血浆没有彻底灭活还可能导致细胞黏连，使细胞死亡，最终导致细胞培养效果不好。

8、细胞数量分离较少，NK细胞如何诱导培养？

需先保证NK培养的起始密度，外周血起始密度为1.3~1.5*10⁶，脐血起始密度为2.0~2.5*10⁶，再确定起始体系，补液体积按比例相应减少，前期补液时添加血浆保证细胞增殖速度。

9、细胞洗涤用DPBS还是生理盐水？

DPBS缓冲液PH值在7.2-7.4之间，是细胞最适合的PH值范围。且在酸碱微量的刺激下PH值基本不会发生变化。而培养细胞使用过的培养基PH值会发生变化，对细胞有伤害，细胞经过DPBS缓冲液清洗会去除废弃的培养基，而保持细胞能在适合的PH值范围之内，良好生长。从而再换新的培养基使细胞继续增殖。